Sigma：分散酶®II

屬性：

質量水平：100

表單：lyophilized solid

比活：≥0.5 units/mg solid

技術：

cell culture | mammalian: suitable
single cell analysis: suitable

溶解性：10 mM NaAc (pH 7.5) and 5 mM CaAc: soluble

儲存溫度：2-8°C

說明：

應用：

來自Sigma的該酶已被用于開發用于離體培養小鼠胚胎乳腺芽的實驗方法。[1]它已被用于在從大鼠心臟分離線粒體的過程中對大鼠心臟碎片進行處理。[2]它還被用于通過酶水解來分離牙髓干細胞（DPSC）。這些細胞已與通過外植體方法而分離的DPSC進行了比較，以分析它們的干細胞和分化特性。[3]
中性蛋白酶® II已用于熒光激活細胞分選（FACS）。[4]它還被用于分離內臟卵黃囊層。[5]
適用于制備測序用單細胞懸浮液。

生化/生理作用：

中性蛋白酶®II是一種中性的蛋白酶，可水解非極性氨基酸殘基的N-末端肽鍵。它可用于分離生長在體外的多種組織和細胞。該酶非常溫和，不會對細胞膜造成損傷。它還可用于防止懸浮培養物中的細胞結塊。該蛋白酶可水解纖連蛋白和IV型膠原蛋白，但不能水解層粘連蛋白、V型膠原蛋白、血清白蛋白或轉鐵蛋白。[6]中性蛋白酶®II具有切割亮氨酸-苯丙氨酸鍵的特異性。Ca2+、Mg2+、Mn2+、Fe2+、Fe3+和Al3+ 可滅活分散酶I。EDTA、EGTA、Hg2+ 和其他重金屬可抑制該酶活性。[7]每g-mol純化分散酶I含有1g鋅原子。如果通過EDTA或EGTA等螯合劑除去鋅成分，則產生無活性的酶蛋白。該酶不受血清抑制。

外形：

含有乙酸鈣和乳糖的凍干粉

制備說明：

可通過將粉末溶解在含有10 mM NaAc (pH 7.5)和5 mM CaAc的緩沖液中制備50 U/mL的儲備溶液。它應當被儲存在4 °C。

分析說明：

該酶初始可以10 mg/ml溶解于50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl中。 進一步的稀釋應當在zui 適于待解離細胞的培養基中進行。 中性蛋白酶是一種金屬蛋白酶，可通過包括Ca2+ , Mg2+, Mn2+以及Fe2+在內的二價陽離子激活。

其他說明：

除特殊說明，在pH 7.5，37 °C 條件下，一單位的酶每分鐘將會水解酪蛋白以產生與1.0 μ摩爾 (181 μg) 酪氨酸等同的顏色（Folin-Ciocalteu試劑提供的顏色）。

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